PCR로 분석을 수행하는 방법 : 절차에 대한 설명

폴리 메라 이제 연쇄 반응은 30 년 동안 알려져왔다. 고고학에서부터 유전학에 이르기까지 많은 분야에서 널리 사용되고 있습니다.

친자 관계를 수립하는 데 도움이되는 것은 PCR 방법이지만, 대부분 인체에서 다양한 전염병을 확인하는 데 사용됩니다.

PCR 분석은 어떻게 수행 되는가? 우리는이 질문들에 대해 상세하게 대답하려고 노력할 것입니다.

PCR 분석 -이게 뭐야?

중합 효소 연쇄 반응 (PCR)은 분자 유전 진단의 고정밀 방법으로, 급성 및 만성 단계에서 인간의 다양한 전염성 및 유전성 질환을 검출 할 수 있으며 질병이 나타날 수 있기 훨씬 전부터 가능합니다.

PCR 방법은 절대적으로 특이적이고 정확하게 수행하면 위양성 결과를 얻을 수 없습니다. 즉, 감염이 없다면 분석은 그것이 무엇인지를 결코 보여주지 않을 것입니다. 따라서 현재 진단의 승인을 위해 매우 자주 사용되고 있으며 원인 분석과 그 특성을 결정하기 위해 추가적인 PCR 분석이 수행됩니다.

Carey Mulllis (USA)가 개발 한 1983 년의 중합 효소 연쇄 반응 (PCR). 그는 1993 년에 노벨 화학상을 수상했습니다.

이 방법의 장점은 무엇입니까?

이 방법으로 진단하면 연구중인 물질에 들어있는 유전자에서 병원균을 직접 찾을 수 있습니다. 이것은 생식기 감염, 숨겨진 감염, 다양한 성병에 대한 가장 정확한 분석입니다.

차이점 실험실 연구의 다른 방법에서 PCR 진단은 다음과 같습니다 :

• 이 방법은 병원체 자체를 확인하는 것을 목표로한다.
• PCR 진단은 보편적이다 : 몇몇 병원균의 검출;
• 질병의 경우 환자의 생물학적 시료 하나만 있으면 충분합니다.
• 이 방법은 매우 민감하고 다른 교차 반응을 수반하지 않습니다.

또한 PCR 진단의 장점은 환자의 생체 재료가 혈액, 생식기, 소변, 정액으로부터의 분비에 적합하다는 것입니다.

PCR에 감염되면 어떤 감염이 나타 납니까?

많은 양의 병원균이 체내에 존재할 수 있으며, 오랫동안 자신을 드러내지 않는 "숨겨진"병원균을 포함합니다.

PCR에 대한 스미어 분석은 그러한 감염을 밝힐 수 있습니다.

PCR 검사 물질은 일반적으로 객담, 타액, 소변 및 혈액입니다. 분석을하기 전에 의사와 예비 상담을 한 상태에서 조심스럽게 준비해야합니다.

PCR을위한 혈액은 일반적으로 공복시에 투여됩니다. 좋은 결과는 연구 자료가 자궁 경관이나 요도에서 가져온 분석을 보여줍니다. 이 경우 성교 후 1 일 이내에 PCR 진단을 실시하는 것이 가장 좋습니다.

PCR의 다양성

PCR은 많은 분야에서 분석과 과학 실험에 사용됩니다. 분석 방법에는 여러 가지가 있습니다.

1. 역전사 PCR (Reverse Transcription PCR, RT-PCR (영어))은 RNA 라이브러리에서 알려진 서열을 증폭, 분리 또는 동정하는데 사용됩니다.
2. 역전 된 PCR (Inverse PCR (Inverse PCR (Eng.)) - 원하는 서열 내에서 작은 부분 만 알면 사용됩니다. 이 방법은 DNA가 게놈에 삽입 된 후 인접한 서열을 결정할 필요가있을 때 특히 유용합니다.
3. 중첩 PCR (Nested PCR)은 반응 부산물의 수를 줄이는 데 사용됩니다. 2 쌍의 프라이머를 사용하고 2 회의 연속 반응을 수행한다.
4. 비대칭 PCR (Asymmetric PCR)은 주로 원래 DNA의 사슬 중 하나를 증폭 할 필요가있을 때 수행됩니다. 일부 시퀀싱 및 하이브리드 화 분석에 사용됩니다.
5. 정량적 PCR (정량적 PCR, Q-PCR (영국)) 또는 실시간 PCR은 각 반응 사이클에서 특정 PCR 생성물의 양을 직접 모니터링하는 데 사용됩니다.
6. Step PCR (Touchdown PCR (Eng.)) -이 방법을 사용하면 프라이머의 비특이적 결합 효과를 감소시킬 수 있습니다.
7. 그룹 특이적인 PCR (group-specific PCR) - 하나 또는 다른 종 사이의 관련 서열에 대한 PCR.

매트릭스의 뉴클레오타이드 서열이 부분적으로 또는 알려지지 않은 경우, 염기 서열이 존재하는 서열을 포함하는 퇴행성 프라이머 (degenerate primers)를 사용할 수있다. 예를 들어, 프라이머 서열은... ATH...이고, 여기서 H는 A, T 또는 C이다.

조사 대상 생물 자원은 무엇입니까?

외래 박테리아 DNA가 검출 될 수 있거나 바이러스의 DNA 또는 RNA가 다양한 생물학적 배지 및 인체로 구성 될 수있는 PCR 연구를위한 물질 :

1. 소변. 남성의 비뇨 생식기 및 여성의 비뇨기 장기 감염에 사용할 수 있습니다 (남성의 경우 소변을 재료로 사용하면 상피 치료를 대신합니다).
2. 방귀. 그것은 결핵을 진단하고 덜 일반적으로 클라미디아와 마이코 플라스마 증의 호흡기 형태를 진단하는 데 사용됩니다. 15-20 ml의 양의 정액을 멸균 된 (일회용) 병에 모아 둡니다.
3. 생물학 유체. 전립선 주스, 늑막, 뇌척수염, 양수, 관절액, 기관지 폐포 세척, 타액은 적응증에 따라 채취됩니다.
4. 점막의 상피 긁기. 임질, 클라미디아, 마이코 플라스마 증, ureaplasmosis, trichomoniasis, gardnerellezis, herpetic 및 점막에 영향을 미치는 기타 감염과 같은 성병을 진단하는 데 일반적으로 사용됩니다.
5. 생검. Helicobacter pylori 감염을 확인하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 위와 십이지장 생검.
6. 혈액, 혈장, 혈청. B 형 간염, C 형, D 형, G 형 바이러스, 헤르페스, CMV, HIV, 인간 유전자의 PCR 분석에 사용됩니다.

분석을 준비하는 방법?

PCR 결과의 신뢰성은 검사를위한 재료 전달의 정확성에 직접적으로 의존합니다. 물질이 오염되면 안됩니다. 그렇지 않으면 연구 결과가 객관적이지 않습니다. PCR 분석을 제출하기 전에 가장 중요한 권장 사항은 다음과 같습니다.

1. 소변은 아침에 멸균 된 용기에서 배달됩니다.
2. 감염 검사는 아침에 공복시에해야합니다.
3. 분석 전날 성행위를 할 필요는 없습니다.

분석 결과는 수술 후 1.5-2 일 내에 준비됩니다. 결과가 같은 날에 준비 될 수있는 상황이 있습니다.

CRP의 분석 디코딩

제시된 연구의 해석 과정은 단순함으로 구별됩니다. PCR 분석의 결과는 물질 전달 후 1.5-2x 일 이내에 얻을 수 있습니다. 어떤 경우에는 그 결과가 첫날에 준비되며 이것이 의미하는 바입니다.

• 부정적인 결과는 진단하는 물질에 전염병이 없다는 것을 나타냅니다.
• Pcr 양성은 병원체의 DNA 또는 RNA가 인체에 존재한다는 것을 의미합니다.

어떤 경우에는 미생물에 대한 정량적 인 측정을하십시오. 이것은 기회주의 미생물에 의해 야기되는 질병에 특히 해당됩니다. 이 박테리아는 과도한 양에 대해서만 부정적인 영향을 미치기 때문에.

또한, PCR의 정량 분석은 치료 전술의 선택과 HIV 및 간염 바이러스와 같은 바이러스 감염의 치료를 제어하는 ​​데 중요합니다.

감염의 PCR 진단은 얼마나 정확합니까?

PCR 방법은 높은 정확도, 특이성 및 민감도를 특징으로합니다. 즉,이 분석은 다음을 수행 할 수 있습니다.

• 감염의 유무를 정확하게 결정한다.
• 정확하게 어떤 종류의 감염 (특이성)을 지정하십시오;
• 생물학적 물질에서 미생물의 DNA 함량이 매우 낮더라도 감염을 탐지 할 수 있으며,
• 연구 (감수성)를받은

PCR 분석 : 가격 및 시간

특정 분석의 가격은 귀하가 검사 할 감염에 따라 다릅니다. 대략적인 가격 및 조건 :

1. STI : 300-500 루블, 시간 - 1 일;
2. 엡스타인 - 바 바이러스, 인간 유두종 바이러스, 헤르페스 바이러스, 거대 세포 바이러스 : 300-500 루블, 기간 - 1 일;
3. A 형 간염, B 형, C 형, D 형, G 형 : 650 루블의 정성 분석, 2000 루블의 정량 분석. 조건 - 최대 5 일;
4. C 형 간염 바이러스에 대한 항체, 총 (항 -HCV) - 420 루블;
5. C 형 간염 바이러스 항체, IgM (항 -HCV IgM) - 420 루블;
6. Helicobacter pylori (Helicobacter pylori) : 300-400 루블, 기간 - 1 일;
7. HIV (항체 및 항원) - 380 루블;
8. HIV RNA, 양적으로 - 3,500 루블;
9. HIV RNA, 정량적으로 - 11,000 루블.

비용을 절감하기 위해 고정 된 배치 분석을 선택할 수 있습니다. 이 서비스는 ERP 방법 (invitro, onclinics 등)에 의한 분석을 통과 할 수있는 대다수 클리닉에서 제공됩니다.

결핵에 대한 PCR 진단

결핵은 특정 감염이며, 수년간 인간의 조직에 집중되어 있고 몇 달 동안 퍼져 나간다. 이것은 최적의 치료 요법을 선택하기 어려운 만성 질환입니다. 그 이유 중 하나는 인체에서 이미 많은 약제에 적응해온 mycobacteria의 후기 진단입니다.

현대적인 진단 방법은 무엇입니까? PCR 진단 - 그것은 무엇입니까? 이 연구는 어떻게 이루어 집니까? 어떤 경우에이 방법으로 결핵이 진단되며 그 본질은 무엇입니까?

PCR 진단이란 무엇인가?

이것은 질병뿐만 아니라 생물학적 물질의 검출을 진단하는 가장 현대적인 방법 중 하나입니다. PCR 진단은 비교적 최근에 발명되었습니다. 약 30 년 전 1983 년에 미국의 생화학자인 Carey Banks Mullis는 하나의 짧은 세그먼트에서 미생물의 생물학적 물질에 대한 복잡한 회수 계획을 제안했습니다. 그의 발견으로 과학자는 노벨상을 수상했습니다.

그것은 무엇입니까 - 감염의 PCR 진단? 중합 효소 연쇄 반응 (PCR)은 유전 공학의 방법에 기반한 바이러스 성 질병의 진단 진단입니다. 그것은 널리 의료 미생물학, 면역학 및 바이러스학에 사용됩니다. 이 방법은 보편적이며 소량의 물질로 진단하는데 도움이됩니다. 질병의 첫 증상이 나타나기 훨씬 전에 감염된 지 1 시간 만에 감염이 문자 그대로 감지 될 수 있습니다.

이 방법은 병원균 자체가 아니라 유전체 (DNA 입자)의 파편 인 물질로부터 아픈 사람의 물질을 얻는 것으로, 그 유전체 물질이 속한 미생물의 종류가 분자 유전 학적 방법에 의해 속하는 것인지를 결정하는 것이다.

이것이 복잡한 과정이라는 사실에도 불구하고 많은 생물학적 감염원 검출 방법보다 훨씬 적은 시간이 소요됩니다. 단 몇 시간 만에 미생물을 PCR로 검출 할 수 있습니다. 이를 위해서는 환경 (혈액, 뇌척수액, 가래)에서 분리하여 인공 영양소 배지에서 오랫동안 성장시킬 필요가 없습니다. 연구 대상 물질에 감염 물질의 DNA 가닥의 작은 단편이 존재하면 충분합니다.

반응의 기초는 감염성 물질의 핵산 분자의 합성을 만드는 인공적 조건 (시험 관내) 하에서의 가능성이다.

PCR에 필요한 것은 무엇입니까?

1. 프라이머는 생합성 또는 창조가 시작되는 DNA 분절입니다.
2. DNA 또는 RNA 분자의 기초가되는 핵산 또는 복합 화합물.
3. PCR을 가속화시키는 효소 인 중합 효소의 존재 없이는 중합 효소 연쇄 반응이 불가능합니다.

PCR 진단 단계

PCR에 의한 분자 진단은 어떻게 이루어지는가? 절차는 간단하며 재료의 수집을 고려하여 짧은 시간이 소요됩니다.

1. 연구를 시작하기 전에, 그들은 필요한 생물학적 물질을 섭취합니다 - 이것은 기관지 세척수, 혈액, 위 내용물, 가래입니다. 생물학적 물질의 유형은 의심되는 병원균에 달려 있습니다.
2. 두 개의 사슬로 구성된 DNA의 일차 구조의 변성 또는 파괴. 이 단계의 핵심은 고온의 영향으로 2 개의 체인을 분리하는 것입니다 (최대 2 분 동안 지속되는 최대 98 ° C).
3. 어닐링이라고 불리는 PCR의 다음 단계에서 프라이머가 DNA 가닥에 결합 할 수 있도록 온도가 몇도 정도 감소합니다.
4. 신장 (Elongation) : 원하는 분자의 합성이 직접 일어난다.

결과적으로, 단지 25-30주기 만이 미생물 DNA의 필요한 수의 사본을 수신하며, 이것은 인식하기 쉽다.

PCR은 결핵 진단을 필요로합니까?

결핵 의심 의심 사람들은 값 비싼 장비가 필요하기 때문에 PCR을 수행하는 것은 절대 불가능합니다. 모든 공립 진료소가 그것을 살 여유가있는 것은 아닙니다. 또한, 대부분의 경우 감염을 진단하는 일반적인 방법도 스스로를 정당화하는 일이 일어났습니다.

여기에는 다음이 포함됩니다.

• 환자 조사, 역사 복용;
• 그 사람의 완전한 심사;
• 만 투스 투베르쿨린 검사를 이용한 연구;
• 방사선 촬영 또는 형광 검사;
• 필요한 경우 컴퓨터 진단;
• 미생물 학적 연구 방법 : 도말 현미경 검사 및 객담 세균 검사.

결핵에 대한 PCR은 특별한 경우 진단이 어렵거나 다른 방법을 사용할 수없는 경우에 수행됩니다.

풍부한 진단 방법에도 불구하고 결핵 발병률은 계속 증가하고 있습니다. 현재 성장뿐만 아니라 다른 기능도 있습니다.

• 이 질병은 종종 심각한 형태로 발생합니다.
• 치명적인 경우의 수가 증가합니다.
• 현대 화학 요법에 점점 저항하는 것은 질병의 진단 된 형태입니다.

백신 접종을 거부하면 결핵의 확산으로 이어지는 사람들의 일상적인 건강 검진을 꺼리는 것입니다. 이러한 조건에서, 우리는 어린이와 성인이 접근 할 수있는 신속하고 유익하며 효과적인 연구 방법이 필요합니다. 위의 모든 진단 방법은 PCR보다 훨씬 열등합니다.

PCR로 결핵 진단의 이점

이 연구는 새로운 것이지만, 여러 가지 이유로 진단을 내릴 수없는 논쟁의 여지가있는 경우 특히 그 자체로 잘 입증되었습니다.

PCR 덕분에 검사 물질에서 결핵의 원인 인자를 발견하는 것이 훨씬 쉽습니다.

PCR 진단의 이점은 다음과 같습니다.

1. 이것은 빠른 분석입니다. DNA 분자의 작은 단편은 불과 몇 시간 만에 진단하는데 사용될 수 있으며 (예 : 수술 전에 환자가 결핵에 걸렸는지를 결정할 필요가있을 때) 응급 상황에서 성공적으로 사용됩니다.
2. PCR 분석은 다른 방법을 사용할 수 없거나 금지되어있는 경우에 허용됩니다 (폐결핵의 검출을 위해 방사선의 많은 양이 될 방사선 이미지를 여러 번 찍어야하는 경우도 있음).
3. PCR의 도움으로 모든 생물 환경에서 병원균의 존재 여부가 검사됩니다. 예를 들어, 결핵성 수막염의 의심이있는 경우 뇌척수액에 대한 연구를 수행 할 수 있습니다.
4. 소아에서 전염병의 PCR 진단이 가능합니다. 그 방법이 안전하기 때문입니다.
5. 질병의 모든 단계에서 병원체를 식별 할 수 있습니다.
6. 생물학적 물질에 미생물이 몇 개인 경우에도 PCR의 민감도가 높기 때문에 Mycobacterium tuberculosis를 검출 할 수 있습니다.
7. 질병 재발의 진단을 위해 수행하는 것이 좋습니다.

결국 모든 판독 PCR은 거의 완벽한 진단 방법으로 보이며 모든 사람이 결핵 의심에 빠지게됩니다. 그러나 여기에도 단점이 있으며, 고려해야합니다.

결핵 진단에서 PCR의 단점

우리 시대에는 그러한 진단이 규칙 성보다 더 희귀합니다. 그리고 이것 때문에 이유가 있습니다.

1. 이것은 값 비싼 연구 방법입니다. 많은 클리닉에서는 PCR 비용이 높기 때문에 PCR 장비가 없지만 유료 실험실에서도 분석을 수행 할 수 있습니다.
2. 치료 직후, 죽은 마이코 박테리아 또는 소량으로 살면서 인체에 여전히 존재할 수 있습니다 (결과는 PCR 진단 중에 양성입니다). 따라서이 방법은 현재 신뢰할 수 없으므로 실시하지 마십시오.
3. Mycobacteria의 돌연변이로 인해 효과없는 PCR이 발생합니다. 일반적인 DNA 가닥 서열은 합성 될 수 없습니다.
4. 연구에 적합한 환경을 선택할 필요가 있으며, 감염된 것으로 의심되는 경우에만 혈액을 채취하고 (패혈증), 신경계 장기의 결핵에 관한 문제가있는 경우에는 가래를 취할 필요가 없습니다. 이 경우 PCR은 병원균을 검출 할 수 없으며 진단은 정보가 될 수 없습니다.

PCR 분석을 이용한 결핵 검출 지표

논란의 여지가있는 경우에는 결핵에 대한 PCR 진단이 가장 자주 시행됩니다. 의사가이 연구를 언제 참조합니까?

1. 일반적인 방법을 사용하여 진단하기가 어렵지만 결핵 환자와의 접촉이있는 경우.
2. 결핵에 대한 정기 검사를 받기 위해 진료소에 환자를 보낼 수없는 경우, 시험용 객담을 항아리에 담아 진단 할 수 있기 때문에 PCR로 검사하는 것이 더 쉽습니다.
3. 사람이 비상 수술을받을 경우 결핵에 걸렸다는 것을 알아내는 것이 시급합니다.
4. 필요한 경우 임산부는 PCR을 사용하여 결핵 검사를하는 것이 안전합니다.
5. 유료로 결핵으로 진단되지 않은 사람은 세균 학적 방법과 형광 투시법을 사용하여 확인되었습니다. 이것은 직접적인 이미지에서 폐의 병변이 감지 할 수없고 연구 가래 배달 중 사람이 정확한 재료 수집을위한 권장 사항을 따르지 못했을 때 발생합니다. 이 경우 폐결핵의 모든 증상을 걱정합니다.
6. Mantoux 검사의 결과에 의문이 생길 때.
7. 소아에서 결핵의 PCR 진단을하는 것이 바람직합니다. 이 절차는 안전하고 추가적인 방사선 노출을 유발하지 않으며, 질병의 형태를 진단하기 어렵다는 것을 탐지하는데 효과적입니다.

적절한시기에 치료를하고 질병의 확산을 줄이려면 적절한시기에 결핵 진단이 중요합니다. 흔히 친숙한 질병 탐지 방법이 항상 효과적이지는 않습니다. 따라서 오늘날 PCR은 개발 초기 단계에서 감염을 탐지하는 가장 신뢰할 수 있고 안전한 방법 중 하나입니다.

PCR 분석

PCR (polymerase chain reaction)은 전염병을 진단하는 데있어 가장 빠르고 신뢰할 수있는 방법입니다.

폴리 메라 이제 연쇄 반응 법의 원리는 1983 년 Kary Mullis에 의해 개발되었다. 그의 발견을 위해 1993 년 Kullis는 노벨 화학상을 받았다.

PCR 방법은 생물학적 물질 (시료)에서 특정 핵산 단편 (DNA)의 농도를 유의하게 증가시킬 수 있습니다. 이 방법은 인공 조건에서 효소를 사용하여 DNA의 특정 부분을 다중 선택 복사 (증폭)하는 것에 기반합니다.

감염성 질환의 진단 방법으로서의 PCR 진단법의 장점

병원균 직접 검출

효소 면역 측정법과 같은 많은 전통적인 진단 방법은 전염병의 중요한 활동의 ​​산물 인 단백질 마커를 검출하여 감염의 간접적 증거 만 제공합니다. PCR 방법에 의한 병원체의 특정 DNA 영역의 동정은 병원균의 존재를 직접적으로 알려준다.

높은 특이성

PCR 방법의 높은 특이성은 연구중인 물질에서 독특한 DNA 단편이 검출된다는 사실에 기인합니다. 특이성은 교차 반응 항원과 관련된 오류가 빈번한 면역 학적 분석 방법과 달리 거짓 결과를 얻을 가능성을 배제한 프라이머의 뉴클레오티드 서열에 의해 결정됩니다.

고감도

PCR 방법은 세균이나 바이러스의 단일 세포조차도 탐지 할 수 있습니다. PCR 분석은 다른 방법 (면역 학적, 세균 학적, 현미경 적)이이를 수행 할 수없는 경우에 감염성 질병의 병원체의 존재를 밝혀줍니다. PCR 분석의 민감도는 샘플 당 10-100 개입니다 (면역학 및 현미경 검사의 감도는 103-105 개입니다).

다양한 병원균 검출 절차의 보편성

PCR에 의한 연구 자료는 병원균의 DNA이다. 상기 방법은 특정 유기체에 특이적인 DNA 단편 또는 RNA의 검출에 기초한다. 모든 핵산의 화학적 조성의 유사성은 실험실 연구의 통일 된 방법의 사용을 허용한다. 이를 통해 단일 생물 검정으로부터 여러 병원균을 진단 할 수 있습니다.

높은 분석 률 결과

PCR 분석을 위해, 병원균의 배양 물의 분리 및 배양은 필요하지 않으며, 많은 시간이 걸린다. 생체 물질 처리 및 반응 생성물 검출 및 증폭 과정의 자동화 된 통합 방법을 통해 4-5 시간 내에 완벽한 분석을 수행 할 수 있습니다.

급성 감염뿐만 아니라 잠재 성 감염도 진단 할 수있는 능력

PCR 방법은 잠재적으로 잠복기 감염 및 만성 감염에서 발생하는 미생물의 미생물, 미 배양 및 지속적인 형태의 진단에 특히 효과적이다. 왜냐하면이 방법은 실험실에서 그러한 미생물을 재배하는 것과 관련된 어려움을 피하기 때문이다. PCR 진단법의 사용은 높은 항원 변이성 및 세포 내 기생충을 가진 병원균에 대해서도 매우 효과적이다.

PCR에 의한 결핵 검사는 얼마나 효과적입니까?

사람의 코크 스틱을 확인하기 위해 다양한 진단 방법이 사용됩니다. 덕분에 병리학은 초기 단계에서도 발견 될 수 있으며 이로 인해 환자의 회복 가능성이 높아집니다. 결핵에 대한 간질 분석은 가장 높이 평가되고 매우 효과적 인 기술입니다. 그러한 분석은 얼마이며 그 비용은 얼마입니까?

PCR에 의한 가래의 분석은 무엇입니까?

PCR은 중합 효소 연쇄 반응을 의미합니다. 이 방법은 전염병에 효과적입니다. 분명한 진단을 내리기 위해서는 객담 파종의 경우처럼 많은 양의 생체 적합 물질을 수집하고 오랜 시간을 기다릴 필요가 없습니다.

이 방법은 미생물 입자의 DNA를 얻는 것을 기본으로합니다. 또한, 분자 유전 연구는 어떤 유형의 미생물이 이용 가능한 물질을 포함해야 하는지를 결정할 것이다. 시험관 조건 하에서, 전문가는 박테리아 분자를 합성하고 몇 시간 안에 적절한 결론을 내릴 것입니다.

효과

Mychobacterium tuberculosis에 대한 Sputum 분석은 Koch의 지팡이가 호흡계에 부딪쳤을 때 효과적입니다. 이 경우, 감염 초기 시간에도 쉽게 질병을 확인할 수 있습니다.

그러나 객담 분석은 결핵이 존재한다면 신뢰할만한 결과를 보여주지 못할 것입니다 :

• 뼈;
• 뇌, 척수;
• 신경계;
• 관절 등

phthisiatrician은 현재의 증상을 고려하고 일반 및 기타 분석 결과에 의존하여 질병 유형을 결정할 수 있습니다.

또한 질병의 치료 적 치료 후에 통제 분석을 수행해야 할 경우 이러한 연구 방법에 부적합합니다. 그 결과는 신체에서와 마찬가지로 긍정적일 것이며, 어쨌든 살아 있거나 죽은 IBC가 있습니다. 다른 진단 절차를 선호하는 것이 좋습니다.

방법 금기

따라서 PCR을 사용하는 결핵에 대한 가래 검사에는 금기 사항이 없습니다. 한계가 있습니다. 위에서 언급했듯이 결핵 치료 후 시행 할 필요는 없습니다. 결과는 유용하지 않습니다. 여기서 다른 진단에 의지하는 것이 바람직합니다.

또한이 진단을위한 다른 장애물도 없습니다. Sputum은 모든 연령 카테고리 및 관련 질병에 대해 검사 할 수 있습니다. 객담이 풍부하게 배출되지 않아도 기관지 내시경 검사를 통해 점액을 채취하여 분석 할 수 있습니다.

이점

이 방법에서 플러스의 질량은 다음과 같습니다.

1. 높은 특이성과 민감성. 결핵의 원인균 만 검출됩니다. 절차의 모든 뉘앙스가 고려되면 잘못된 대답이있을 수 없습니다. Mycobacteria는 최소 수에서도 탐지됩니다. 수집 된 물질에 10 개의 비정상 세포가 있어도 감염이 감지됩니다.
2. 대답을 얻는 속도. 얼마나 많은 분석이 이루어 졌습니까? 3-5 시간 후에 결과를 얻을 수 있습니다. 결핵에 대한 객담 배양을 할 필요가 없기 때문에 시간이 단축됩니다.
3. 당신은 감추어 진 감염과 급성 형태 인 것을 확인할 수 있습니다.
4. 절대 금기 사항은 없습니다. 이것은 예외없이 (심지어 어린 아이를위한) 모든 사람을위한 절차를 수행 할 수있게하며, 특히 다른 방법이 해결되지 않을 때 가능합니다.
5. PCR 진단을 통해 각종 생체 재료 (소변, 대변, 혈액, 타액, 뇌척수액 등)를 연구합니다.
6. 이 방법은 감염 후 첫 시간에 초기 단계에서 결핵을 밝혀냅니다.

↑ 내용

단점

긍정적 측면뿐만 아니라 부정적인 측면도 있습니다. 이것은 :

1. PCR 분석은 비싼 "즐거움"입니다. 또한 모든 의료 센터에서 구현을 위해 필요한 장비를 이용할 수있는 것은 아닙니다. 클리닉에서는 그 가치가 너무 크기 때문에 거의 출석하지 않습니다. 우리가 사설 클리닉에 관해 이야기한다면, 그렇습니다. 이런 종류의 진단을 찾을 수 있습니다. 유감스럽게도 모든 사람이 자신을 허용 할 수는 없습니다.
2. 최근 결핵 치료를받은 사람들에게서 위양성 결과를 보여줍니다.
3. MBC가 돌연변이 된 경우이 방법은 잘못된 결과를 줄 수도 있습니다.
4. 자료가 잘못 수집되거나 연구를 수행하는 전문가의 자격 수준이 충분하지 않으면 오작동이 발생할 수 있습니다. 경우에 따라 절차를 여러 번 반복하여 지불을 반복해야합니다.

↑ 내용

분석 준비

고품질의 재료를 얻으려면 재료를 올바르게 조립하고 적절히 준비해야합니다.

결핵에 대한 가래를 수집하기위한 특정 규칙이 있습니다. 동작 알고리즘은 다음과 같습니다.

1. 저녁이 되더라도 저녁에는 가임약을 마셔야합니다 (가래가 잘 움직이지 않는 경우). 그것이 도움이되지 않더라도, 약은 희석제와 거담제를 토대로 흡입을해야합니다. 객담이없는 경우, 환자는 기관지 내시경의 대상이됩니다. 이 절차를 진행하는 동안 연구 자료가 필요합니다.
2. 특별한 용기를 미리 구입하십시오. 그것은 무균이며 밀폐되어 있으므로 사전에 개봉 할 수있을뿐만 아니라 추가로 배치 할 수 없습니다.
3. 가래가 수집되는 방은 통풍이 잘되어야합니다. 창문, 문을 열어야하고 후드를 켜야합니다. 또 다른 좋은 방법은 신선한 공기를 얻는 것입니다 (예 : 발코니 또는 안뜰에).
4. 절차가 시작되기 전에 모든 사람에게 방을 들어서 아무 일도 일어나지 않도록 모든 사람에게 경고해야합니다. 생체 재료에는 여분의 미세 입자가 없어야합니다. 이것이 중요합니다.
5. 따기 전에 먹는 것은 권장하지 않습니다.
6. 입과 목구멍을 헹구십시오.
7. 침은 밖으로 뱉어 낸다. 용량이 최소가되어야합니다.
8. 기침으로 사람은 가래를 꺼내어 준비된 용기에 넣습니다. 절차가 끝나면 뚜껑을 꼭 닫고 샘플을 실험실로 가져갑니다.

가래를 수집하는 방법은 의사에게 말해야합니다. 환자가 감히 스스로 감히 치료하지 않으면 의료 종사자가 구출됩니다. 조작하는 동안 특수 보호 마스크를 착용했습니다. 가래를 모으는 것은 낯선 사람을위한 길은없는 특별한 방에있을 것입니다. 환자가 병원에 ​​올 수없는 경우 전문가가 집에 와서 점액을 수집하는 데 도움이됩니다.

기관지 내시경 검사가 끝나면 환자는기구 (기관지 내시경)로 기관에 주사됩니다. 물자가 가지고 간다 그의 도움으로이다.

안정성을 위해 다음 세 번 분석을 전달하는 것이 좋습니다.

• 아침에 공복에;
• 4-5 시간 후에 처음으로;
• 첫 번째 연구 24 시간 후 식사 전.

↑ 내용

이 분석은 어떻게 이루어 집니까?

결핵에 대한 가래 검사를 통과하는 것은 그 일의 일부일뿐입니다. 주요 전방. 전문가를 어떻게 준비해야하는지에 달려 있습니다.

연구 과정은 다음과 같습니다 :

1. 전문가는 DNA의 기본 구조 (변성)의 파괴로 나아 간다. 여기에는 두 개의 체인이 있습니다. 고온에서, 그들은 분리되어있다.
2. 다음 단계에서 온도가 감소합니다 (어닐링 됨). 이것은 프라이머와 DNA 가닥의 연결에 필요합니다.
3. 세 번째 단계는 신장입니다. 여기서 필요한 분자가 합성됩니다.

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결과 디코딩

PCR에 의한 가래의 결핵균을 검출 할 수 있습니다. 긍정적 인 결과는 Koch가 생체 재료에 DNA를 붙인다는 사실에 근거합니다. 이는 해당 사람이 감염되었다는 의미입니다. 부정적 - 98 %의 피험자가 감염되지 않았 음.

지표는 다음에서 판단 할 수 있습니다.

• 병리학의 어떤 단계 (잠재 성 또는 활동성);
• 신체가 얼마나 영향을 받는지;
• 선택된 치료가 특별한 경우에 효과적인지 여부.

아무 것도 철저하지 않다는 것을 명심하십시오. 따라서 거짓 긍정 또는 거짓 결과가있을 수 있습니다. 정확성을 보장하기 위해 다른 진단 절차를 권장하거나 PCR을 두 번 (3 번) 수행합니다.

여러 센터의 비용 ​​분석

다른 클리닉에서 PCR을하기 위해 객담을 줄 수 있습니다. 가격 정책과 함께 인기있는 여러 모스크바 센터의 예를 들어 보겠습니다.

결핵 검사를위한 가래 검사 방법

결핵에 대한 간질 분석은 진단을 확인하고 명확하게하기 위해 필요한 일련의 진단 조치에 포함됩니다. Sputum 함량이 유능한 치료법을 만드는 데 도움이 될 것입니다.

결핵에 대한 가래 검사를 통과시키는 법

의사는 분석을위한 규칙을 개발했습니다. 아침 식사 전에 타액이 수집됩니다. 첫째, 환자는 위생 절차를 수행합니다.

• 치아 에나멜 청소;
• 구강 및 인두의 깨끗한 물로 철저히 헹구십시오.

그런 다음 분석을 위해 자료를 즉시 전달하기 시작합니다. 가래 검사를 통과하는 방법? 절차 요구 사항 :

1. 저녁에 미리 준비가 시작됩니다. 환자는 폐 분비물을보다 자연스럽게 만드는 특별한 약을 복용하는 것이 좋습니다. 이들은 거담제와 간질 화합물입니다. 그러한 조치가 도움이되지 않는다면, 기대하는 약용 조성물로 흡입하십시오.
2. 가래 용 용기를 준비하십시오. 점액은 멸균 된 접시에 수집하여 단단히 밀폐해야합니다.
3. 배달하기 전에 기침을하고 용기에 침을 뱉으십시오. 타액은 크지 않아야합니다. 후두에서 가래가 필요합니다. 구강의 박테리아는 분석에서 불필요합니다.
4. 통풍이 잘되는 방에서 타액을 수집하십시오. 분석은 후드를 움직이는 트랜 섬을 열어서 수행됩니다. 창문을 열거 나 신선한 공기를 마시는 것이 좋습니다.

방 안에있는 동안 절차는 입력 할 수 없습니다. 외부인은 사무실의 미생물 및 가래의 병리 조직에 기여할 수 있습니다. 의료 종사자는 특별한 마스크 (호흡 보호구)로 분석을받습니다.

결핵 진단 결과에 대한 가설 분석

디코딩은 점액의 모양을 보는 것으로 시작됩니다. 병리학은 색깔의 변화를 특징으로합니다 - 혈액의 눈에 보이는 혼합물과 함께 어둡게됩니다. 색상이 주요 지표가 아닙니다. 적포도주 술, 커피 열정 때문에 술이 어둡게됩니다. 일부 약물과 착색 된 음료는 점액의 모양을 바꿉니다.

수집 된 자료는 의사가 두 가지 결과를 얻는 두 가지 지표로 해독됩니다.

긍정적 인 답변

결과 가뭄의 분석은 신체의 질병의 존재를 확인합니다. 이것은 다음을 확인합니다.

• 이물질 또는 알려지지 않은 개재물;
• 점액 응고의 존재;
• 눈에 보이는 줄무늬;
• 불쾌한 화농성 또는 전염성 냄새;
• 고름.

거시적 연구 방법은 다른 데이터를 제공합니다 :

• 섬유 성 회선;
• Koch 렌즈 막대 모양 형성;
• 박테리아 물질의 분해 분해 산물;
• 폐 조직의 병리학 적 과정의 잔해.

양성 결과는 단백질 화합물의 증가 된 양을 나타낸다. 그것은 100-120g / l에 도달합니다.

또 다른 현미경 적 방법은 다른 위험한 요소를 식별하는 것이 가능합니다 :

• 폐포 대 식세포;
• 백혈구의 과대 평가;
• 높은 림프구 비율.

결핵의 경우, 사람은 종종 자신의 입에서 침을 뱉어 봅니다. Hemoptysis는 적혈구의 형성을 증가시킵니다. 입안의 타액은 사람이주의를 기울이지 않고 삼키지 못하게합니다. 그것은 건강한 상태 이상입니다.

부정적인 대답

이 연구에 따르면 백혈구 수가 적고 규범에 해당하는 것으로 나타났습니다. 미생물도 검출되지 않습니다. 환자가 건강하지 못한 것으로 느껴질 경우 전문가는 추가 검사를 처방합니다. 이 질환은 폐 질환과 관련이있을 수 있습니다. 추가 진단의 유형 및 방법은 환자의 증상 및 상태에 따라 다릅니다.

점액의 연구 방법

결핵은 폐 조직에 위험한 병리학 적 영향을 미치며, 붕괴가 관찰됩니다. 분석은 몇 가지 방법으로 수행됩니다. 가장 보편적 인 ELISA (immunoassay). 이 방법의 본질 :

1. 항체는 가래의 일부가 놓인 용액에 첨가됩니다.
2. 건강한 신체의 규범과 비교하여 항원의 농도를 확인하십시오.
3. 병리 환경의 활동을 결정하십시오.
4. 진단.

실험실 연구의 두 번째 버전은 WASTES입니다. 이 방법은 특별한 의료 장비를 가져 가십시오. 하드웨어 연구의 본질 :

1. 가래에서 의도 된 감염 유형에 대한 미세 환경을 주사했습니다.
2. 상기 장치는 일정 온도의 박테리아 균주에서 성장하기 시작한다.
3. 공정에서 이산화탄소가 생성되고 센서가이를 흡수합니다.
4. 가스는 염료와 결합합니다.
5. 형광 색인에 ​​질병 유형에 대한 결론을 내립니다.

가장 쉬운 방법은 문화입니다. Phlegm은 특별한 환경에 뿌려졌습니다. 의사는 미생물 형성 체의 유형을 검사합니다. 이 방법은 가장 길지만 진단을 증명할 수 있습니다. 그것은 매우 드물게 사용되는데, 오랜 기간 동안 환자에게 항상 적절한 것은 아니기 때문입니다.

결핵에 대한 객담 pcr의 분석

PCR은 의학 용어 인 중합 효소 연쇄 반응의 약자입니다. 진단은 과학자의 최신 개발 중 하나입니다. 그것은 1983 년에 개관되었으며, 발견의 중요성은 세계에서 인정 받고 있으며 과학자는 노벨상을 가장 많이 수상했습니다.

이 방법은 유전 공학의 사용을 기반으로합니다. 정확한 진단을 위해 소량의 재료가 필요합니다. 결핵 감염은 질병 발생을 기다리지 않고 감염 초기에 나타납니다.

중합 효소 인 방법의 본질 :

• 환자가 DNA 입자 조각을 취한다.
• 물질의 생물학적 합성을 수행한다.
• 미생물 군에 의해 결정된다.

이 과정은 기술적으로 복잡하며 분자 유전 학적 검사가 필요합니다. 결핵에 대한 PCR은 말 그대로 몇 시간 걸립니다. 다른 방법에 필요한 시간은 그와 속도를 비교할 수 없습니다. 분석을 통과 한 후, 환자는 원인 약제의 검출을 기다리고있다. 전문가의 기초가되는 프로세스는 이해할 수 있습니다. 일반인은 방법의 복잡성을 이해하지 못합니다.

결핵 검사의 진단은 어떻게됩니까?

1. 분석에 필요한 재료를 가져 가라. 그것은 무엇이 될 수 있습니다 : 혈액, 위장, 가래, 물, 기관지로 씻어 냈습니다.
2. 물질의 유형은 감염 가능성이있는 병원균의 유형에 따라 선택됩니다.
3. 다음 단계는 체인 연결을 연구하는 것입니다. 두 체인은 최대 98 도의 고온에 노출됩니다. 이 단계를 변성 (구조 DNA 사슬 파괴)이라고합니다. 온도 노출 시간 - 최대 2 분.
4. 다음 단계는 어닐링입니다. 온도가 내려 가면 프라이머가 DNA 가닥에 연결됩니다.
5. 결과적으로, 연신이 발생합니다 - 과정에 필요한 분자의 합성.

이러한 분석을 위해서는 특수 장비가 필요합니다. 비용이 많이 들기 때문에 의료 시설에서는 이용할 수 없습니다. PCR은 어려운 경우에 수행되는데, 기존의 진단 방법의 정확한 결과가 없으면 환자의 상태를 검사하는 도구 적 방법을 수행하는 것은 불가능합니다.

PCR 기술의 장점 :

1. 결과를 얻는 속도. 의사가 정확한 데이터를 가지고있는 약 5 시간. 이 속도로 응급 상황에서 환자를 도울 수 있습니다. 종종 수술 전 기간입니다.
2. 다른 방법을 사용할 수없는 경우 허용됩니다. 예를 들어, 자주 반복되는 X 선은 방사선을 유도합니다. PCR은 환자에게 위험하지 않습니다.
3. 생물학적 환경을 탐구 할 수 있습니다. 결핵의 복잡한 형태조차 확인됩니다.
4. 이 방법은 안전하므로 어린이에게 적합합니다.
5. 감염은 어느 단계에서 발견됩니다.
6. PCR은 적은 수의 박테리아 미세 형성조차도 숨길 수 없습니다.
7. 결핵의 재발 가능성을 검사하는 데 적합합니다.

결핵에 대한 가토 분석은 얼마입니까?

샘플은 두 번 이상 찍습니다. 반복은 오류의 가능성을 배제하거나 환자의 진정한 위치와 상태를 반영하지 못하는 품질이 낮은 재료를 얻는 것을 배제합니다. 가래를 수집하는 횟수는 주치의에게 알리십시오. 최선의 선택은 하루에 세 번입니다. 때로는 추가 샘플이 필요할 수 있습니다. 그들이 수집하는 기간 동안 :

1. 아침에 먹기 전에.
2. 첫 번째 검사 후 3-4 시간.
3. 둘째 날에도 식사 전에.

결핵은 모든 사람의 신체에 영향을 줄 수있는 위험한 질병입니다. 감염의 많은 상황이 있습니다. 감염의 가능성이 의심되면 밝은 증상이 나타날 때까지 기다리지 마십시오. 검사를 받고 검사를 받아야하고 치료를 시작할 시간 내에해야합니다.

소아 및 성인의 결핵에 대한 PCR 진단 :

세계 보건기구 (World Health Organization)는 20 년 전 결핵 확산률이 통제 불능 상태에 있으며 전염병의 규모에 도달했다고 인정했습니다. 그 이후로 상황은 개선되지 않았습니다. 매년 1 백만 건이 넘는 질병이 진단되며 그 중 약 1/4이 치명적입니다. 지난 10 년 동안 어린이 발병률이 증가했으며, 대부분의 형태는 표준 항생제 치료에 적합하지 않습니다.

오늘날 의학의 글로벌 과제 중 하나는 뚜렷한 임상 증상이 나타나기 전에 병리학을 확인하는 진단 방법 개발입니다. 그 중 하나는 결핵에 대한 폴리 메라 이제 연쇄 반응 (PCR)으로, 이는 혈액, 객담 및 기타 생물학적 유체에서 코흐 병을 유발하는 스틱을 감지하는 데 도움이됩니다.

결핵 진단

선별 검사는 환자, 결핵 운반자를 발견하고 사회 감염 확산을 예방하기위한 검사입니다. 14 세 미만 어린이의 경우 Mantoux 검사가 많이 사용됩니다. 이것은 여러 종류의 미코 박테리아의 유전 물질의 복합 혼합물 인 투베르쿨린을 피하 주사하는 면역 학적 검사입니다. 뚜렷한 반응의 출현은 활발히 발생하는 전염성 과정을 나타냅니다.

fluorography 또는 x-ray를 사용하는 성인의 예방 검진. 이 방법은 폐 조직의 병리학적인 병변을 시각화하는 데 도움이됩니다. 그러나 결핵을 다른 유기 병리학 (악성 및 양성 종양, 염증 과정, 기생충 침습, 전문 폐 손상)과 구별하는 것이 어려워집니다.

병리학 적 초점의 구조와 크기를 명확히하기 위해 추가적인 도구 연구가 필요할 수 있습니다.

• 타겟 된 방사선 촬영;
• 컴퓨터 단층 촬영;
• 자기 공명 영상.

결핵 진단 방법

의심스러운 결과가 나오거나 적절한 치료법을 정하는 경우 병원체를 격리 할 수있는보다 정확한 진단 방법이 필요합니다. 객담의 현미경 및 세균 검사는 폐결핵을 장기간 확인하는 데 사용됩니다.

최근 몇 년 동안 신장, 뼈, 내장, 피부 등 다양한 장기 및 시스템의 마이 코박 테 리움이 더 자주 발생합니다. 이러한 형태의 결핵, 초음파 검사, 소변 및 대변 배양을 확인하기 위해 내시경 검사를 사용할 수 있습니다.

결핵에 대한 PCR 진단은 혈액 내 Koch 스틱의 존재와 특정 약물에 대한 민감성을 확인하는 데 도움이됩니다. 이것은 다양한 생물학적 유체에서 박테리아 유전 물질의 검출을 기반으로 매우 효과적인 방법입니다.

특이성 및 적응증

폴리 메라 이제 연쇄 반응은 유전 공학의 원리에 기초한 매우 민감한 미생물 학적 진단 방법입니다. 생물학적 물질에서 병원균의 존재를 확인하기 위해서는 그것의 고유 한 핵산 단편을 검출하는 것으로 충분합니다. 결핵에 대한 PCR은 혈액, 객담, 소변에서 박테리아를 검출 할 수 있습니다.

현재, 여러 가지 분석 방법을 개발했습니다. 그 중 가장 인기있는 것은 다음과 같습니다.

• 실시간 PCR;
• 미세 유체 기술;
• 시퀀싱 및 파이로 시퀀싱.

실시간 PCR

실험실은 가짜 양성 결과의 수를 줄이기 때문에 실시간 중합 효소 연쇄 반응을 가장 자주 사용하며 분석 과정 자체는 짧은 시간이 걸립니다.

많은 종류의 숨겨진 형태의 질병과 표준 진단법의 비 효과 성을 감안할 때 PCR이 점점 더 많이 사용되고 있습니다. 이 분석의 목적은 다음과 같습니다 :

• X- 레이상의 수상한 부위를 확인하는 단계;
• 투베르쿨린 검사의 의심스러운 결과;
• 심각한 상태의 사람에서 가래의 현미경 및 세균 학적 분석을 수행 할 수 없음;
• 감염이 없다는 것을 신속히 확인하는 것이 필요할 때 외과 적 개입을 수행합니다.
• X 선 또는 전산화 단층 촬영 (예 : 과도한 방사선 노출의 경우 임산부 및 모유 수유기)의 사용 불허;
• 폐외 결핵이 의심됩니다 (혈액뿐만 아니라 가래도 사용하는 것이 좋습니다).

결핵에 대한 PCR 진단은 추가 노출 부족과 빠른 결과로 인해 아동 검사에서 입증되었습니다.

준비 및 분석 절차

혈액 PCR을위한 특별한 준비는 필요하지 않습니다. 그러나 혈액 샘플링의 합병증을 피하고 고품질의 물질을 얻으려면 다음의 일반 규칙을 따라야합니다.

• 아침에 깨어 난 후 2 시간 이내에 분석해야한다.
• 그것은 혈액 샘플링 전날 지방과 튀김 음식의 섭취량을 제한해야합니다.
• 8-9 시간 동안은 차와 커피를 먹지 말고 깨끗한 물을 마셔야합니다.
• 3-4 시간 이상 흡연하지 마십시오.

영원한 약물 (호르몬, 항응고제, 항염증제, 항생제, 혈액 희석제)의 경우 실험 조교에게이를 알려야합니다.

가래가 나왔을 때, 치아를 잘 닦고 입을 여러 번 헹구어 야합니다. 멸균 된 용기에 물질을 수집하십시오. 더 나은 결과를 위해서, 저녁에는 거담제 또는 점액 용해제를 복용 할 수 있습니다.

진단 자체는 여러 단계로 구성됩니다.

울타리 소재. 그것은 실험실에서 그리고 원격으로 수행 될 수 있습니다. 환자가 독립적으로 수집하는 일부 유형의 물질 (소변, 가래).

핵산 구조의 파괴 (DNA와 RNA 분자의 변성). 이를 위해 시험 물질을 98 도의 온도로 가열하고 몇 분간 유지합니다. 결과적으로, 이중 나선이 풀리고, 단일 가닥 분자가 형성된다.

어닐링 프라이머 (핵산의 짧은 부분)를 첨가 한 후, 온도가 몇도 정도 감소하고, 중합 효소가 활성화된다.

Elognation. 온도를 최적 수준으로 올리고, 효소 활성이 최대에 도달하고, 제 2 사슬이 Chargaff 상보성 규칙에 따라 완료된다.

이 연구를 완료하기 위해서는 필요한 수의 DNA 분자를 합성 할 필요가 있습니다. 위의 반응은 약 50 사이클입니다. 약 2-3 시간이 걸립니다. 반응의 긍정적 인 결과는 항상 질병의 활성 단계를 나타내지는 않지만 신체의 미생물 존재의 지표입니다.

방법의 장단점

다른 미생물 학적 방법과 비교하여 PCR은 PCR을 사용하여 Mycobacterium tuberculosis를 검출하는 데 오랜 시간이 걸리지 않으며 결과는 검사 당일에 얻을 수 있습니다.

또 다른 장점은 분석의 높은 특이성으로 거의 모든 생체 물질 (혈액, 소변, 대변, 뇌척수액, 가래, 기관지 세척)에서 90-95 %의 정확도로 병원체의 존재를 탐지 할 수 있습니다.

그러나이 방법에는 몇 가지 단점이 있습니다.

• 무생물 미생물의 검출과 관련된 오진 율이 높은 비율 (최대 15 %);
• Mycobacterium tuberculosis는 종종 돌연변이와 유전 물질의 변화를 겪기 때문에 어떤 경우에는 질병의 사실을 무시할 수 있습니다.
• 면역 결핍 환자의 검사에서 낮은 효율성;
• 높은 연구 비용, 값 비싼 장비 및 시약의 필요성.

무엇을 대체 할 수 있습니까?

결핵 감염의 다양한 형태를 감안할 때보다 정확한 진단과 치료 선택을 위해서는 몇 가지 진단 연구를 병행해야합니다.

아이들을위한 필수 분석은 Mantoux 테스트입니다. 투베르쿨린 (mycobacteria의 유전 물질)의 도입이 뚜렷한 반응을 일으키면 결핵균으로 감염 될 수 있습니다.

병리학 적 초점을 시각화하기 위해 X 선법을 사용할 수 있습니다. 폐외 결핵 진단에서 내시경 검사는 동시 생검과 함께 사용됩니다.

• 기관지 내시경 검사는 후두, 기관, 기관지의 병변을 확인하는 데 도움이됩니다.
• 대장 내시경 검사 - 내장;
• 방광경 검사 - 비뇨 기관의 기관;
• hysteroscopy - 여성 생식기. 이러한 방법은 구체적이지 않으며 정확한 진단을하기 위해 병원균을 확인해야합니다.

일반적인 임상 검사는 신체 상태를보다 명확하게 결정하는 데 도움이됩니다. 백혈구 수식을 사용한 완전한 혈구 수가 필요합니다.

림프구 수치가 감소하고 적혈구 침강 속도 (ESR)가 증가한 호중구 수가 증가하면 세균 병인의 활동성 염증 과정이 나타납니다. 멸균을위한 일반적인 요 검사 및 배양을 통해 비뇨기 기관의 손상을 배제합니다.

PCR은 현재 대부분의 개인 실험실에서 이용 가능합니다. 이것은 고도로 숙련 된 전문가뿐만 아니라 값 비싼 장비와 많은 시약을 필요로합니다. 따라서이 방법의 사용은 높은 정확성과 특이성에도 불구하고 제한적입니다.

결핵 진단을위한 PCR의 장점과 단점

특정 결핵 감염은 수년 동안 인간의 조직과 구조물에 존재했으며 어떤 상황에서는 2 ~ 3 개월 만에 빠르게 전염됩니다. 때로는 최고의 치료 과정이 늦은 진단과 많은 약제에 대한 병원체의 적응 때문에 선택하기가 매우 어렵습니다.

결핵의 최신 PCR 진단은 질병의 첫 징후가 아직 나타나지 않았을 때 개발 된 질병뿐만 아니라 병원체 자체를 감지하는 데 도움이됩니다.

PCR은 무엇입니까?

최근 PCR에 의한 결핵 진단이 나타났다. 1983 년 미국의 미생물 학자 인 Cary Mullis는 미생물을 생물학적 물질로 재구성 할 수있는 절차를 발명했습니다. 이 작품은 노벨상을 받았습니다.

결핵에 대한 PCR은 유전자 조작에 의한 바이러스 성 병원균의 진단 및 검출을위한 고분자 사슬 과정입니다. 이 기술은 면역학, 미생물학, 바이러스학 및 생화학 실험실에서 사용됩니다.

보편적 인 방법은 의사가 증상이 시작되기 오래 전부터 감염된 후 1 시간이 지난 후에도 감염 과정을 진단하고 확인하는 데 도움이됩니다. 소량의 생체 재료로도 연구가 가능합니다.

분석에 필요한 것은 무엇입니까?

• 생물학적 합성이 시작되는 몇 개의 DNA 조각 (프라이머);
• 뉴클레오타이드 화합물, DNA 분자 또는 RNA의 기초;
• PCR 분석을 가속화하는 폴리머 라제 효소.

이 방법의 기초는 무엇입니까?

먼저, 유전자 분자 생합성 방법을 사용하여 감염된 사람의 생체 물질에서 DNA 단편을 추출하고, 그 생물 단편이 속한 미생물의 유형을 더 결정한다.

이 복잡한 반응은 일부 생물 방법보다 시간이 덜 걸린다. PCR은 몇 시간 내에 병원체를 결정하지만 생물학적 유체 (가래, 뇌척수 또는 혈액 매개체)로부터 분리 할 필요는 없지만 영양 배지에서 장시간 성장시킬 필요는 없습니다. 연구 된 물질에 감염성 병원균의 DNA 가닥이 포함되어 있으면 충분합니다.

체외에서 결핵에 대한 PCR 혈액 검사를 실시 할 때, 결핵균의 리보 핵산 합성은 인위적으로 만들어집니다.

진단 단계

PCR에 의한 분자 반응은 시간이 조금 걸리는 간단한 절차입니다. 필요한 생체 재료를 채취합니다 : 혈액, 가래, 기관지 세척액을 사용하여 tbc를 결정합니다.

1. 첫째, DNA의 주요 형태는 파괴되고, 2 개의 사슬은 고온에서 분리됩니다 (최대 98 ° C는 2 분 이상 걸리지 않습니다).
2. 그런 다음, 어닐링이 수행되고, 1 차 온도가 수 개의 분할로 감소되며, DNA 가닥은 프라이머에 연결된다;
3. 다음 단계는 필요한 분자 구조의 생합성과 함께 연신이라고합니다.

필요한 DNA 사본 수를 얻기 위해서는 25에서 30 사이의 사이클이 통과해야하며 결과로 나타나는 마이코 박테리아의 수는 쉽게 인식됩니다.

결핵에 대한 PCR을 수행해야합니까?

TVC가 의심되는 모든 환자에게 직접적으로 체인 진단은 실시하지 않습니다. 절차에서 값 비싼 장비를 사용해야하기 때문입니다. 특히 결핵균을 진단하는 일반적인 방법이 유익하기 때문에 모든 의료기관에서 구입할 수있는 것은 아닙니다.

• 조심스런 병력 복용, 환자의 질문;
• 외부 검사;
• 만 투스 투베르쿨린 검사;
• 방사선 투과 또는 형광 검사;
• 필요한 경우 컴퓨터 진단 프로그램.
• 가래가있는 마스크의 현미경 적 또는 세균 학적 검사.

결핵에 대한 PCR은 다른 기기 분석을 수행 할 수 없거나 진단하기 어려운 경우에만 수행됩니다.

수많은 진단 방법이 개발 되었음에도 불구하고 결핵 환자 수가 계속 증가하고 있습니다. 또한이 질병의 중증 형태가 종종 관찰되며 사망자 수가 증가하고 병원균은 기존 화학 요법 약물에 내성을 갖습니다.

많은 사람들이 매년 정기적 인 검사를 받기를 원하지 않고 예방 접종을 거부하고 이로 인해 발생률이 증가합니다. 그러한 상황에서는 tbc로 진단받은 성인과 어린이에게 효과적이고 유익한 연구 방법이 필요합니다. PCR은 다른 진단 방법에 비해 장점이 있습니다.

이 방법의 가치는 무엇입니까?

이 최신 연구는 잘 입증되었습니다. 여러 가지 이유로 진단을 내리기가 어렵거나 논쟁의 여지가있는 경우 PCR은 결핵균을 다른 방법보다 생물학적 물질에서보다 쉽게 ​​검출합니다.

• 분자의 작은 부분 인이 빠른 연구는 약 5 시간 내에 단시간 내에 정확한 진단을 가능하게합니다. 예를 들어, 긴급한 외과 적 개입 전에 응급 상황에서 사용됩니다.
• 결핵에 대한 혈액 검사는 다른 방법을 사용할 수 없거나 금기 일 때 가능합니다. 때로는 tbc 병원체를 검출하기 위해 많은 Rg 주사를 사용해야하며 방사선 량이 너무 큽니다.
• 폴리 메라 이제 반응을 사용하여 모든 생물학적 유체를 마이코 박테리아의 존재 여부를 검사 할 수 있습니다. 예를 들어, 결핵성 수막염 또는 비뇨 생식기 결핵이있는 소변으로 뇌척수액을 연구 할 수 있습니다.
• 이 방법은 안전하며, PCR을 사용하는 어린이의 결핵 진단은 어려움을 일으키지 않습니다.
• 고분자 반응의 방법은 질병의 모든 형태와 단계에서 결핵균을 밝혀냅니다.
• 생체 재료에 소수의 박테리아 만 존재하면 민감한 반응이므로 미생물의 존재를 확인할 수 있습니다.
• PCR은 쉽게 질병의 재발을 진단합니다.

엄청난 수의 이점에도 불구하고, 단점이 있기 때문에, tbc 연구의 혐의로 모든 환자는 완료되지 않습니다, 그들은 또한 고려됩니다.

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단점은 무엇입니까?

이 진단 방법은 자연보다 매우 예외적인데 이유는 이유가 있기 때문입니다. 우선, 방법의 높은 비용이 고려됩니다. 장비가 비싸고, 공립 진료소는 높은 가격 때문에 구입할 기회가 없지만 유료 실험실의 대부분은 장비를 갖추고 분석됩니다.

• 이 방법은 치료 후 죽은 박테리아를 검출하는 반면, PCR은 긍정적 인 결과를 보여준다. 화학 요법 직후, 결과를 신뢰할 수 없기 때문에 연구를 수행하는 것은 의미가 없습니다.
• Mycobacterium tuberculosis 돌연변이는 감수성이 있으며,이 방법의 비효율을 초래하고 DNA 가닥을 일관되게 합성 할 수 없습니다.

연구 환경은 신중하게 선택해야하며, 감염 의심이있는 경우에만 혈액이나 소변을 수집 할 수 있습니다. 뼈 결핵이 의심되는 경우 검사를 위해 가설을해서는 안됩니다. 이 경우 진단이 잘못됩니다.

결핵에 걸린 환자의 혈액과 소변을 PCR로 검사하는 경우는 거의 없으므로이 방법으로 질병을 확인하는 것은 의문의 여지가 있습니다. 이러한 생물학적 매개체에서 병원균은 패혈증 또는 파종 된 결핵의 경우에만 결정됩니다. 현지 양식이 가장 일반적이며 혈액 및 소변은 변경되지 않습니다. 대부분의 경우 가래 검사를받습니다.

누가 분석을 보여 주나요?

대부분의 환자는 논란의 여지가 있고 어려운 결핵의 경우 PCR 진단을 위해 보내집니다. 의료 전문가는 언제 연구에 대한 추천을 발행합니까?

1. 결핵으로 확실하게 진단 받았지만 기존의 방법으로는 진단하기 어려운 사람과 접촉 할 경우;
2. 이러한 상황에서 클리닉을 제공 할 환자가 방사선 촬영이나 기타 연구에 불가능한 경우. 이러한 상황에서는 폴리머 방법을 사용하여 검사하는 것이 더 쉽습니다. Sputum 분석은 특수 용기에 실험실로 전달되며 결과는 몇 시간 후에 알려집니다.
3. 수술 전에 환자가 결핵에 걸렸는지 여부를 결정하는 것이 시급합니다.이 경우 PCR이 지시됩니다.
4. 이 방법의 안전성 때문에 임신 한 여성이나 어린이를 추가로 X 레이로드를 만들지 않고 조사 할 수 있습니다.
5. 의심스러운 Mantoux 테스트 결과.

세균학 및 형광 투시법을 사용하여 결핵이 확인되지 않은 경우 원하는 사람은 유료로 검사를받을 수 있습니다. 이것은 폐 조직의 병변이 직접 투영의 Rg 이미지에서 보이지 않고 환자가 가래를 올바르게 수집 할 수 없지만 인간 결핵의 징후가 방해되는 경우에 발생합니다.

진단을위한 현대의 PCR 반응은 성공적인 치료의 열쇠이며, 그 결과 질병의 유병율이 감소합니다. 질병을 확인하는 전통적인 방법으로 항상 원하는 효과를 낼 수있는 것은 아닙니다.

따라서 지금까지의 PCR 분석은 질병의 초기 단계에서 신뢰성 있고 안전한 진단 방법 중 하나가되었습니다.